《明年春天 - 和大流感的百年之约》
第26节

作者: 京虎子
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  突然,有人建议1918年大流感,马上得到共识。样本库里有的是1918年大流感中死亡的军人的肺部样本,因为当年死在大流感中的官兵比死在一战战场上的还多。用PCR技术,他们可以从样本中扩增出1918年大流感病毒的核酸片段,从这里开始,也许能解决历史遗留下来的西班牙大流感病毒之谜。

  不过,八十多年过去了,一代一代的科学家一直没有发现西班牙流感病毒的痕迹,说明没有那么容易。样本库里面的样本保存了那么多年,对于是否还能扩增出病毒基因片段来,不应该抱太大的希望。
  这是一个抱着知其不可为而知目的的项目,以一种很低调的形式进入了准备阶段。
  军内做事按步就班,项目定下来,离开始行动还有几个月申报和准备时间,利用这段时间,陶本伯格和安•里德开始了解西班牙流感。
  陶本伯格本人只是在医学院读书是听到过西班牙流感,里德更是闻所未闻,两人首先读的是克瑞斯比的书。
  项目开始之后,还是很低调。因为陶本伯格的主要工作还是要为军队提供一个分子生物学诊断实验室,这只是他的一个次要的小项目。
  如果从外表看,多数人会不相信陶本伯格是一个实验室的主任,而是会把他当成一名博士后或者在读研究生。陶本伯格有一张娃娃脸,而且衣着随便,这么多年了还是学生打扮,行事作风也不像个实验室的老板,唯一让人觉得他有些成熟的是他开着一辆二手的奔驰车,这辆车是1995年他的大儿子出世后购买的,因为他觉得家里要有一辆大一点的安全性强的车子,这一点体现了陶本伯格沉稳的为人行事作风。

  华盛顿周围有很多研究单位,特别是NIH,是美国国家级研究机关,作为军队的医学研究中心,沃尔特•里德医学中心的地理位置很不好,位于华盛顿城中治安很差的地区,如果每天早上驾车经过那周围,会发现街道上一片狼藉,很可能昨晚上还上演过真人版的黑社会大片。当然研究中心内部安全无比,因为有军队负责保安。这样一来工作人员大多不居住在附近,每天开很远来上班。

  中心内部也看起来像个军营,在这种情况下,陶本伯格的实验室所在的那个五层楼还能被人看成是怪物。没有一栋窗户,墙壁是三英尺的水泥。这是冷战时期的杰作,当年为了防备苏联,军方建议所有联邦建筑物要能防止飞机轰炸,这所建筑物就是作为样板的,准备一旦战争发生,总统和内阁成员可以到这里来避难。但是建成以后才发现,这个建筑物根本不能承受氢弹打击,联邦政府因此省下了一大笔钱,这座建筑物改成办公室和实验室,可是谁也不愿意待在不见天日的楼里,最后轮到病理所倒霉。

  陶本伯格的办公室在三楼,非常袖珍,里面到处是纸张,大楼的门口有门卫,来往的客人要验明身份,然后由陶本伯格亲自下楼来接,事情办完后还得由他亲自送到门外,如此阴森的环境和高规格的待客方式造成很多科学同行不愿意到这里来,使得陶本伯格在科学界更像一个自我封闭的圈外人。
  在这样的环境下,能够不得抑郁症就已经谢天谢地了,还敢憧憬破解将近九十年的西班牙流感之谜?

日期:2009-07-14 09:50:29

  4. 失败之中
  陶本伯格的实验室虽然是一个诊断性的实验室,但在病毒方面有成功的先例。
  1993年底,有人上门求助,是同行,一位军队的病理学家,不过是兽医。美军的兽医不管猫狗等宠物,而是负责野生动物。1987年,新泽西沿海的海豚开始大量死亡,很快,美国东边沿岸的海豚都患上一种不明原因的疾病,上万只海豚死亡。
  环保署进行了调查,结果表明海豚死于污染造成的红潮。军中有人不同意这种结论,如果是污染的话,为什么单单杀死海豚?解剖发现,海豚的脑部、肺部和淋巴有病毒感染,因此怀疑是病毒造成的。
  为了证明这一点,他们来找陶本伯格,希望借助分子生物学的技术提供可信的证据,陶本伯格的下属从海豚样本中分离出病毒的RNA,证明海豚死于病毒感染。
  这段经历让陶本伯格有了研究西班牙流感的信心,他的实验室能够从海豚的病理样本中获得其他病毒的RNA,用同样的技术也应该能够从流感病人的病理样本中获取流感病毒的RNA。
  第一步是找到合适的样本,病理所的样本库在另外一个地方,里面有三百万份样本是1917年后收留的,如果进去逐个找的话恐怕要找到下一辈子了,好在这时样本数据库建立好了,虽然搜索功能还不强大,但已经能够省了他和里德的大量时间。
  主管数据库的工作人员拿到搜索请求后,觉得陶本伯格的想法匪夷所思,他要寻找1918年大流感中死于流感的肺部样本。在那种病来如山倒、满营病人的情况下,医护人员都忙得夜以继日,尤其是美军各个营地,死亡人数动辄以千计算,哪个医生会想到、会有时间切除死者的肺部,然后固定好送到这里?

  除了肺部切片外,陶本伯格还要求病人必须是得病后很快死亡,而不是病了一周之上才死的,因为前者的肺部会有大量的病毒,而后者的病毒很可能不活跃或者不怎么繁殖了。
  两天以后检索结果出来了,数据库里面居然有70份1918年死于流感的病人的肺部标本。这些样本用福尔马林固定,石蜡包裹,同时还附有病历。陶本伯格从中找出六份得病后很快死亡的病例。
  确定了样本之后,陶本伯格并不能马上进行研究,因为如果使用人体组织的话,要经过特别的许可。他写了报告,交上去后,一等就是几个月,这期间他和里德把时间花在了解1918年大流感和流感病毒上。
  批准终于下来了,实验终于可以开始了,那一天是1995年3月19日。
  样本到手后,里德开始处理样本,经过在陶本伯格手下的几年熏陶,她成为世界上少有的几位能够从福尔马林样本进行PCR的专家。样本非常珍贵,他们小心翼翼地处理样本,一丝不苟地进行试验。

  一年多时间过去了,到了第二年六月,所有的努力全部失败了,再度反复重复下去,还会以失败告终,到了仔细总结的时候了。
  陶本伯格首先认真考虑的是,经过这么长的时间,病毒基因是否能够保存在样本里,这种方法是否有成功的可能?他决定,先停下来,验证一下方法是否可行。
  为了验证现有的方法,他选择了另外一次流感大流行,1957年大流感。这次大流感发生在四十年前,这株病毒是已知的,病人样本更容易搞到。
  这一次,更加认真地处理样本,结果第一次PCR就得到了结果,经过序列分析,证明不是污染,而是1957年的流行毒株。
  同样的方法能够从1957年大流感病人的样本中获取流感病毒,证明方法是可行的那么失败的原因只有一个了,就是样本,他们没有找到合适的样本。
  这个样本是究竟在哪里?

日期:2009-07-14 20:16:03

  5. 成名之后
  1918年9月19日,美国南卡罗来纳杰克森军营,21岁的士兵罗斯科•沃恩因为流感住院。
  杰克森军营是炮兵训练营,来自全美各地的四万名年轻人在这里接受有关的训练后,前往欧洲战场。和其他美军营地一样,1918年秋天,这里也到处是流感病人。当年八月,军营的医院一共收治了4807名流感病人,九月份达到9598名,死亡人数最高的一天达到30人。
  一周之后,9月26日早上,沃恩去世。当天下午,军医黑格伏斯进行了尸体解剖,在他的记录下,沃恩是一个很健壮的年轻人,胸腔有大约300毫升液体,左肺有少量出血。黑格伏斯切下沃恩的肺部组织,固定后送往华盛顿保存。
  78年后,这个样本被送到陶本伯格的实验室。

  沃恩的病例很独特,一侧肺严重的细菌性肺炎,这是很多死于流感的病人的共性,在这里很难再找到病毒的痕迹了。但是他的另一侧肺部症状非常轻,还处于感染早期阶段,在他死前应该有大量的病毒繁殖,病理样本库的这些样本中,这一份最有希望存有病毒片段。
  这一次他们终于成功了,虽然只是获得了很小的一个病毒片段,但打开了封闭了将近九十年的一扇大门。有了这一段基因,他们就能够据此寻找下一段,然后再寻找下一段,一段一段地拼凑西班牙大流感病毒的真容。
  1996年8月,他们终于发现了红细胞血凝素蛋白基因。
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